단백질 동정
이론과 하이라이트 히스토리를 확인 할 수 있어요.
자주 출제되는 부분은 아니며, 2차원 전기영동(2-dimensional electrophoresis)의 간단한 원리가 빈출된다.
1. SDS-PAGE Electrophoresis
1) 원리: 단백질의 질량 차이
2) 전처리
(1) SDS(sodium dodecyl sulfate): 단백질의 질량 당 전하 통일
(2) Mercaptoehanol: 단백질 내 이황화결합을 끊어 단백질 모양 통일
3) 구조
(1) Stacking gel: (-) Glycine Protein Cl- (+)
(2) Separating gel: (-) Protein Glycine Cl- (+)
4) 의의: 단백질의 대략적인 분자량 예측 가능
2. Isoelectric focusing
1) 원리: 단백질의 등전점(pI) 차이
2) 과정: pH gradient가 있는 갤에 단백질 로딩 → pH=pI인 지점에서 이동 멈춤
3. 2-Dimensional electrophoresis
1) 원리: 등전점과 분자량에 따라 단백질을 2차원적으로 구분
2) 과정: 등전점에 따라 단백질을 일차적으로 구분한 후, 분자량에 따른 이차적 구분 진행
4. Chromatography
Ion-exchange chromatography | Size-exclusion chromatography | Affinity chromatography |
단백질의 전하에 따른 분리 | 단백질의 크기에 따른 분리 | 단백질의 리간드와의 친화도에 따른 분리 |
Reference
• Lehninger Principles of Biochemistry 8th ed, pp.392-410